Beckman Coulter MoFlo Astrios

MoFlo Astrios

MoFlo Astrios EQ firmy Beckman Coulter jest obecnie jednym z najnowocześniejszych sorterów komórkowych na rynku światowym. Dzięki zastosowaniu systemu jet-in-air o owalnej konstrukcji która wymusza bardziej laminarny przepływ, zapewniając wysoką żywotności po sorcie ma ogromne znaczenie w pracy z komórkami. Ten system w porównaniu do sześciennej kuwety (flowcell) która w swoich narożnikach nie oferuje zachowania takich samych warunków tracąc tym samym znacząco na dokładności. Sorter ma możliwość użycia wysokiego ciśnienia i wyższych szybkości sortowania, aż do 70 000 zdarzeń na sekundę, co wpływa na jego wydajność przy aplikacjach które wymagają milionów zdarzeń. Szybkość akwizycji aż 100 000 cząsteczek / sekundę. Czystość sortowanie wynosi > 99% dla 70 000 EPS, dysza 70 μm przy wartości ciśnienia 60 psi w trybie sortowania Purify (Oczyszczanie) i populacji początkowej wynoszącej 1% zdarzeń pozytywnych. Zgodność z teoretyczną krzywą sortowania w zakresie powyżej 90%. Ma również zdolność do mieszania próbek i kontroli temperatury (możliwość dopasowania temperatury zarówno chłodzenia jak i grzania pod daną aplikację w zakresie –4°C do 40°C z opcjonalną kąpielą wodną), co zwiększa żywotność i przepustowość komórek. AstriosEQ ma zgłoszoną do opatentowania technologię podwójnego rozpraszania przedniego eFSC, dzięki czemu ma zdolność do wyodrębnienia i posortowania cząstek, których nie wykrywają inne sortery (możliwość użycia dwóch różnych przesłon (blocker-bar) jednocześnie lub użycia dwóch różnych progów detekcji dla FSC). Zastosowanie takiego rozwiązania sprawdza się w aplikacjach i sorcie tkanek pierwotnych i różnych heterogennych próbek. Dodatkowo obydwa detektory FSC są PMT (fotopowielacze).  Detektor rozproszenia bocznego SSC można zainstalować na laserze 405nm (równocześnie z detektorem SSC na laserze 488nm) co poprawia rozdzielczość przy pracy z małymi obiektami, takimi jak pęcherzyki (EV) czy egzosomy. AstriosEQ ma zdolność pomiaru oraz sortu w szerokim zakresie cząstek i nie wpływając przy tym na biologię próbki, od małej jak 200 nm do dużych tj. 30 μm średnicy, lub cząstek zarówno małych jak i dużych jednocześnie. System ma 75 i 100 mikronów dysz do standardowego sortu komórek, z możliwością dodania dodatkowych dysz do 200 mikronów, dla szerokiej gamy typów komórek- szczególnie dużych przy utrzymaniu stabilnego strumienia przy niskim ciśnieniu (rzędu 3-4psi). Różnice ciśnień kontrolowane są przez oprogramowanie zapewniające utrzymanie wysokiej dokładności zadanych wartości. Możliwe jest również ręczne sterowanie wartościami ciśnienia w próbkach, płaszczu i wartością ciśnienia uderzeniowego (boost).  Nieutrudniony przepływ komórek znacząco wpływa na żywotność i utrzymanie nienaruszonej biologii komórki. Dodatkowo Sorter posiada automatyczne opóźnienie kropli z jednoczesnym jego monitorowaniem – IntelliSort II wykorzystując specjalnie opracowany algorytm, umożliwiając śledzenie strumienia kamerą w celu kontroli jego punktu odrywania. Po przeprowadzeniu optymalizacji, system IntelliSort II w trybie ciągłym monitoruje ten proces. To rozwiązanie praktycznie w całości eliminuje możliwość kontaminacji próbki w przeciwności do rozwiązań opartych na kulkach.

Z możliwością wyboru laserów:

• Laser UV 355 nm 100mW
• Laser Fioletowy 405 nm 55mW
• Laser Niebieski 488 nm 200mW
• Laser Zielony 532 nm 150mW
• Laser Żółty 560 nm 200mW
• Laser Pomarańczowy 592 nm 200mW
• Laser Czerwony 645 nm 100mW

OPIS PARAMETRÓW TECHNICZNYCH:

WYMIARY (szer. x gł. x wys.)

SORTER

77 cm x 165 cm x 129.5 cm

WAGA

567 kg

UKŁAD OPTYCZNY

Rozdzielczość:

Rozdziela cząstki o minimalnej średnicy 0,2 μm w rozproszeniu do przodu z tła

Czułość fluorescencji:

Czułość fluorescencji < 125 MESF dla FITC i < 110 MESF dla PE przy użyciu kulek Spherotech** 8-pików przy użyciu lasera 488 nm

Zastosowano 32 bitową rozdzielczość sygnału od 4 do 9 dekad w skali logarytmicznej (ponad 4 miliardy kanałów).

Parametry optyczne:

wykorzystanie do 7 przestrzennie oddzielonych laserów w 44 parametrach mierzonych jednocześnie (z 51 dostępnych łącznie)

SYSTEM ELEKTRONICZNY

Parametry akwizycji danych:

Parametry rozproszenia: Rozproszenie do przodu (FSC), obejmuje 2 parametry FSC (model EQ) i rozproszenie boczne (SSC), które jest dostępne tylko dla lasera 488 nm dla wszystkich długości fal ≥ 405 nm

Numery parametrów: wykorzystanie do 7 przestrzennie oddzielonych laserów w 44 parametrach mierzonych jednocześnie (z 51 dostępnych łącznie)

Dostępny sygnał: wysokość dziennika i obszar dziennika, wysokość liniowa, obszar i szerokość dla każdego parametru

Elektroniczna (twarda) częstotliwość przerywania:

• Znikomy czas martwy podczas analizy

Liniowość systemu:

2,0 ± 0,05 (stosunek singletów/dubletów dla komórek CEN barwionych PI)

Przetwarzanie sygnału:

32 bity dla parametrów wysokości impulsu z próbkowaniem 100 MHz

Zakres dynamiki sygnału:

5 dekad dla parametrów logu. Skalę można rozszerzyć do wyświetlania 4-9 dekad.

Kompensacja:

• Cyfrowa matryca kompensacyjna 20X20
• Automatyczna kompensacja z oprogramowaniem Summit
• VisiComp z oprogramowaniem Summit

Możliwość zapisu zdarzeń do:

> 1 miliard zdarzeń plików .fcs bez limitu parametrów

PŁYNY

Dysza typu Jet-in-Air: 70μm, 100μm

Ciśnienie osłony: 10 – 85 psi

Pojemniki na osłony i odpady:

Autoklawowalne 9,45L zbiorniki na płyn osłonowy i na odpady

Wymienna linia próbkowania:

Wymienna linia od SmartSampler do dyszy

SmartSampler (próbki):

• Akceptowane probówki 0,5 mL, 1,0 mL, 1,5 mL, 5 mL, 7 mL, 15 mL, 50 mL. 5 ml to standard. Wszystkie inne są opcjonalne.
• Automatyczne mieszanie próbki
• Regulacja temperatury (-4 do 40°C) z łaźnią wodną (opcja)
• Automatyczne uruchamianie, płukanie wsteczne i wyłączanie
• Dowolny rodzaj probówki (szklana, polipropylenowa, polistyrenowa itp.)
• Detektor pęcherzyków na linii próbki, aby zapobiec przedostawaniu się powietrza do dyszy
• Hermetyczna komora chroni operatora przed przemieszczeniem się probówki lub wyciekiem z pękniętych lub wadliwych probówek

Kontrola ciśnienia płynów:

• Dyferencjał próbki i podbicie są kontrolowane przez oprogramowanie w celu precyzyjnej regulacji.
• Niezawodne regulacje dla próbki, osłony i wzmocnienia są wykonywane ręcznie.

PARAMETRY

Częstotliwość opóźnienia kropli:

regulowana do 200 kHz

Czystość sortowania:

 > 99% przy 70 000 EPS, dysza 70 μm przy 60 psi, przy użyciu trybu sortowania „Purify” i początkowej populacji 1% pozytywnych zdarzeń

Wydajność:

większa niż 90% teoretycznie przewidywanej wydajności

Szybkość akwizycji:

do 100 000 cząstek/s

Częstotliwość sortowania:

Sorter ma możliwość użycia wysokiego ciśnienia i wyższych szybkości sortowania, aż do 70 000 zdarzeń na sekundę, co wpływa na jego wydajność przy aplikacjach które wymagają milionów zdarzeń- Cyklon.

Możliwość sortu na płytki:

• Płytki 6, 24, 96, 384 i 1536-dołkowe
• Niestandardowe
• Kontrola temperatury (podgrzewana lub chłodzona) z łaźnią wodną *(opcjonalnie)

Możliwość sortu do probówek:

• MoFlo Astrios może wykonywać do 6 strumieni sortowania
• 2 strumieniowy: probówki o pojemności 1,5, 5, 15 i 50 mL (opcjonalnie)
• 4 strumieniowy: 3x5 ml plus 1x50 ml (opcjonalnie)
• 6 strumieniowy: probówki o pojemności 1,5 (opcjonalnie) i 5 ml
• Kontrola temperatury (podgrzewana lub chłodzona) z łaźnią wodną *(opcjonalnie)

Możliwość sortu na szkiełka:

• Niestandardowe szkiełka w zdefiniowanym przez użytkownika wzorze

IntelliSort II (automatyczne opóźnienie i monitorowanie):

Sorter posiada automatyczne opóźnienie kropli z jednoczesnym jego monitorowaniem – IntelliSort II wykorzystując specjalnie opracowany algorytm, umożliwiając śledzenie strumienia kamerą w celu kontroli jego punktu odrywania. Po przeprowadzeniu optymalizacji, system IntelliSort II w trybie ciągłym monitoruje ten proces. To rozwiązanie praktycznie w całości eliminuje możliwość kontaminacji próbki w przeciwności do rozwiązań opartych na kulkach.

BEZPIECZEŃSTWO BIOLOGICZNE & PROJEKTOWANIE

• Wysoki odzysk
• System odporowadzenia Aerozolu (opcjonalnie)
• Wymienne rurki do próbek i sonda (SmartSampler to Nozzle)
• Końcówka dyszy do sterylizacji w autoklawie
• Autoklawowalne pojemniki na płyn osłonowy i odpady
• Zdejmowane drzwi komory sortowania
• Komora sortowania bez ostrych rogów (zaprojektowana do łatwego czyszczenia)
• Łatwe do czyszczenia płyty odchylające
• Dysza szybkiego uwalniania
• Górny moduł i kaptur przetestowane przez VHP

Komora bezpieczeństwa klasy II firmy Baker Company z zainstalowanym i działającym urządzeniem MoFlo Astrios zgodnie z warunkami użytkownika końcowego została przetestowana pod kątem aerozolu zgodnie z następującymi międzynarodowymi:

• Międzynarodowy Standard NSF/ANSI 49-2012
• Norma Europejska (EN 12469:2000)

*Certyfikaty są zgodne z lokalnymi normami prawnymi.

ZGODNOŚĆ Z NORMAMI BEZPIECZEŃSTWA

• Class I laser product per 21 CFR 1040
• Class 1 laser product per ANSI Z136.1:2007 and IEC 60825-1